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RNase III, E.coli

  • Cat.No.ON-024
  • Cas.No.
  • 來源重組大腸桿菌
  • 純度>90% by SDS-PAGE
  • 儲存條件-70℃
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產品描述:RNase III, E.coli是同源二聚體,二價金屬依賴的核酸酶。RNase III, E.coli作用于長的雙鏈RNA(dsRNA),產物為12-30bp的dsRNAs,且為5'-PO4, 3'-OH,3'端突出兩個核苷酸。

來源:重組大腸桿菌

規格:0.5U/μL

活性單位定義:1單位活性定義為37℃、20分鐘內,降解1μg dsRNA為siRNA所需的酶量。

酶存儲緩沖液:500mM NaCl, 20mM Tris-HCl (pH8.0, 25℃), 0.5mM EDTA, 0.5mM DTT, 50% Glyercol.

配套溶液:

10X RNaseIII Reaction Buffer, Cat#ON-078, 500mM Tris-HCl (pH7.5, 25℃), 500mM NaCl, 10mM DTT

10X MnCl2, Cat#ON-079, 200mM MnCl2

10X EDTA, Cat#ON-080, 500mM EDTA

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10X RNaseIII Reaction Buffer, Cat#ON-078

10X MnCl2, Cat#ON-079

10X EDTA, Cat#ON-080

建議的操作規程:

1. 按照順序加入下列試劑:

ddH2OX μL
10X RNaseIII Reaction Buffer10μL
dsRNAX μL(10μg)
RNase III10-20 units
10X MnCl210μL
Total Volume100μL

2. 混合后,37℃反應20分鐘。

3. 加入10μL 10X EDTA終止反應。

儲藏溫度:

長期儲存 (使用頻率低時): -70℃

每周或者每天使用: -20℃*

不能儲存在無霜冰箱中。

盡量避免反復凍融,避免放在溫度經常變化的地方。這些溫度波動會大大的降低產品的穩定性。

*RNase III 儲存在-20℃ 可能會有渾濁的現象產生,將酶置于室溫,待溫度達到4~10℃,然后輕輕混合,酶會澄清,并且酶活幾乎沒有損失。

質控檢測:無DNase,Nickase污染,通過功能檢測

純度:SDS-PAGE純度:大于90%

1. Hugh D. Robertson, Robent E. Webster, and Norton D. Zinder. The Journal of Biological Chemistry. 243, 82-91(1968).

2. Neelam Srivastava and Rai Ajit K Srivastava. Biochemistry and Molecular Biology International. 39, 171-180(1996).

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