產品描述:RNase III, E.coli是同源二聚體,二價金屬依賴的核酸酶。RNase III, E.coli作用于長的雙鏈RNA(dsRNA),產物為12-30bp的dsRNAs,且為5'-PO4, 3'-OH,3'端突出兩個核苷酸。
來源:重組大腸桿菌
規格:0.5U/μL
活性單位定義:1單位活性定義為37℃、20分鐘內,降解1μg dsRNA為siRNA所需的酶量。
酶存儲緩沖液:500mM NaCl, 20mM Tris-HCl (pH8.0, 25℃), 0.5mM EDTA, 0.5mM DTT, 50% Glyercol.
配套溶液:
10X RNaseIII Reaction Buffer, Cat#ON-078, 500mM Tris-HCl (pH7.5, 25℃), 500mM NaCl, 10mM DTT
10X MnCl2, Cat#ON-079, 200mM MnCl2
10X EDTA, Cat#ON-080, 500mM EDTA
相關產品推薦:
Ribonuclease Inhibitor, Human Placenta, Cat#ON-039
建議的操作規程:
1. 按照順序加入下列試劑:
ddH2O | X μL |
10X RNaseIII Reaction Buffer | 10μL |
dsRNA | X μL(10μg) |
RNase III | 10-20 units |
10X MnCl2 | 10μL |
Total Volume | 100μL |
2. 混合后,37℃反應20分鐘。
3. 加入10μL 10X EDTA終止反應。
儲藏溫度:
長期儲存 (使用頻率低時): -70℃
每周或者每天使用: -20℃*
不能儲存在無霜冰箱中。
盡量避免反復凍融,避免放在溫度經常變化的地方。這些溫度波動會大大的降低產品的穩定性。
*RNase III 儲存在-20℃ 可能會有渾濁的現象產生,將酶置于室溫,待溫度達到4~10℃,然后輕輕混合,酶會澄清,并且酶活幾乎沒有損失。
質控檢測:無DNase,Nickase污染,通過功能檢測
純度:SDS-PAGE純度:大于90%
1. Hugh D. Robertson, Robent E. Webster, and Norton D. Zinder. The Journal of Biological Chemistry. 243, 82-91(1968).
2. Neelam Srivastava and Rai Ajit K Srivastava. Biochemistry and Molecular Biology International. 39, 171-180(1996).