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mRNA Cap-2'-O-Methyltransferase

  • Cat.No.ON-014
  • Cas.No.
  • 來源重組大腸桿菌
  • 純度>95% by SDS-PAGE
  • 儲存條件-20℃
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產品描述:mRNA Cap-2'-O-Methyltransferase是經大腸桿菌表達、純化的來源于牛痘病毒的重組蛋白。能特異性的將SAM中的甲基轉移至RNA Cap0上形成Cap1的結構。Cap1結構的RNA更能有效的翻譯,改善mRNA轉染實驗中的蛋白表達量。mRNA Cap-2'-O-Methyltransferase需要以m7GpppN Cap 結構的RNA為底物。

來源:重組大腸桿菌

規格:50U/μL

活性單位定義:1單位酶活定義為37℃,1小時摻入10 pmols 甲基到80nt Capped 0 RNA所用的酶量。

酶存儲緩沖液:20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1mM EDTA, 100mM NaCl, 1mM DTT, 0.1%(v/v) Triton X-100, 50%(v/v) glycerol.

配套溶液:10X Capping Buffer, Cat#ON-073, 500mM Tris-HCl, pH8.0, 50mM KCl, 10mM MgCl2, 10mM DTT; S-adenosylmethionine (SAM),32mM, Cat#ON-074.

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10X Capping Buffer, Cat#ON-073

S-adenosylmethionine (SAM),32mM, Cat#ON-074

1. 反應體系中不能含有EDTA;

2. 如為了RNA的穩定性,而加入核糖核酸酶抑制劑,按手冊中反應體系加入至終濃度為1U/μL即可;

3. 在PH7.0-8.0,SAM不穩定,每次反應前需要新稀釋SAM至2mM

4. 在反應前,應對RNA進行熱處理,保證轉錄產物的5'末端二級結構打開;對高二級結構的RNA可以提高熱變性條件,如65度20分鐘,或75度10分鐘,或85度5分鐘;

5. Vaccinia Capping Enzyme 和 2'-O-methyltransferase 可以一起反應用于生產Cap1結構的RNA;

6. 對部分已知的含有復雜5'結構的RNA,反應時間可以延長至3小時。

儲藏溫度:-20℃

質控檢測:無DNase,RNase污染

純度:SDS-PAGE純度:

1. THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY Vol. 250, No. 24, Issue of December 25, pp. 9322-9329,1975.

2. Kuge, H. et al., (1998) Nucl. Acids Res. 26, 3208.

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