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Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile

  • Cat.No.ON-054
  • Cas.No.
  • 來源重組大腸桿菌
  • 純度>95% by SDS-PAGE
  • 儲存條件-20℃
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產品描述:Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile是經大腸桿菌表達、純化的來源于嗜冷海洋細菌的重組蛋白。能特異性識別DNA單鏈或雙鏈中的尿嘧啶殘基,并從DNA上水解釋放游離尿嘧啶。對RNA無活性。該酶主要用于PCR擴增產物的防污染。大腸桿菌來源的尿嘧啶-DNA 糖基化酶較為耐熱,經95℃,10min處理仍會殘留有少量的尿嘧啶-DNA 糖基化酶活性,導致含有dU堿基的PCR產物的降解。來源于嗜冷海洋細菌的Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile 在50℃,2min即完全失活,在進行PCR擴增前,在PCR混合液中添加尿嘧啶-DNA 糖基化酶(熱敏性),25℃,10min即可消除以往PCR產物的殘留污染,由于尿嘧啶-DNA 糖基化酶(熱敏性)在PCR循環的94℃變性一步便可被滅活,因此不會影響新的含dU的PCR產物。

來源:重組大腸桿菌

規格:1U/μL

活性單位定義:37℃條件下,1小時降解1μg含尿嘧啶堿基的單鏈DNA的酶量為1U。

酶存儲緩沖液:20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 1mM DTT, 0.5%(v/v) Tween-20, 0.5%(v/v) NP-40,50%(v/v) glycerol.


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1. Uracil-DNA Glycosylase (UNG),E.coli  失活條件為95℃ 10min,但是Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile的失活條件為50℃ 2min。

2. 在缺少穩定劑的buffer中(如PCR buffer: 10mM Tris-HCl, pH8.0, 50mM KCl, 2.5mM MgCl2) ,酶隨著溫度的升高而加速失活。

3. 建議50μL PCR反應體系中加入1U的Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile。

4. Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile在15~25℃范圍內,擁有100%的酶活。

儲藏溫度:-20℃

質控檢測:無DNase,Nickase和 RNase污染

PCR carry-over prevention: 以5ng dUTP-containing PCR 產物為模板擴增200bp目的DNA。在擴增前加入1U Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile 25℃,10min,無產物進行擴增。

純度:SDS-PAGE純度:大于95%

1. H. Sobek, M. Schmidt, B. Frey, K. kaluza. FEBS Letters. 388, 1-4(1996).

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