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pfu DNA polymerase

  • Cat.No.ON-051
  • Cas.No.
  • 來源重組大腸桿菌
  • 純度>95% by SDS-PAGE
  • 儲存條件-20℃
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產品描述:pfu DNA polymerase是一種熱穩定的DNA聚合酶,其分子量為90kD。具有5'-3'DNA聚合酶活性和3'-5'外切酶活性,能糾正DNA擴增過程中產生的堿基錯配。pfu DNA polymerase相比于Taq DNA Polymerase出錯率較低的,其錯誤率僅為1.3x10-6。其PCR產物為平端,可加A處理再與TA載體連接或使用平末端克隆載體。

來源:重組大腸桿菌

規格:3U/μL

活性單位定義:1單位活性定義為74℃、30分鐘內,摻入10nmoles的dNTPs到酸性不溶物質所需的酶量。

酶存儲緩沖液:50mM Tris-HCl (pH8.2, 25℃), 0.1mM EDTA, 0.1% Tween-20, 0.1% NP-40, 1mM DTT, 50% Glycerol

配套溶液:10X pfu Reaction Buffer, ON-068, 200mM Tris-HCl(pH8.8, 25℃),100mM KCl, 100mM (NH4)2SO4, 20mM MgSO4, 1%Triton X-100.

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1. pfu  DNA polymerase具有3'→5'的外切酶活性, 因此延伸率 (0.5-0.6kb/min) 低于 Taq DNA Polymerase(1kb/min), 延伸時間取決于擴增產物的長度;同時, 由于3'→ 5'的外切酶活性, pfu DNA Polymerase 聚合酶可能會降解引物, 因此配制反應體系時最后加入pfu  DNA Polymerase。

2. 在用 pfu DNA Polymerase擴增時, 需要更高的引物純度。底物長度應大于 18 bp, Tm 值在55-80℃, 引物濃度在0.1-0.5μM之間, 略高于Taq DNA Polymerase.

3. 對于高GC含量的模板, 變性溫度可提高到 98℃,對 DNA Polymerase活性無影響。

儲藏溫度:-20℃

質控檢測:無DNase、Nickase、RNase污染

純度:SDS-PAGE純度:大于95%

1. Kelly S. Lundberg, Dan D. Shoemaker, Michael W. W. Adams, et al. Gene 108, 1-6 (1991).

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